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應用領域 | 食品,農業 |
1. 乳鐵蛋白檢測說明 乳鐵蛋白(LF)是80KDa的糖蛋白,屬于運鐵家族中的一員,可以結合和轉 運鐵離子(Fe 3+)。
乳鐵蛋白檢測存在于生物體液中,是哺乳動物先天免疫系統中的重要成 分。它的保護作用包括直接降低多種生物的生物活性如絕大多數的微生物如細菌、 病毒、真菌、寄生蟲,并且有消炎和抗癌作用。
這些功能作用機制是它不僅可以 結合鐵離子同時糖蛋白會與宿主和病原體的分子和細胞相互作用。
它存在于黏膜分泌物中,如尿和血漿中,尤其在牛奶和牛初乳中含量很高。 它在牛奶中的含量從0.05g/l牛初乳至0.5 g/l牛奶不等。
自2012年歐洲食品安全局批準乳鐵蛋白作為新型的成分添加至嬰配粉中后, 乳鐵蛋白的需求量劇增,尤其是中國。
為了檢測添加的牛乳鐵蛋白的含量,EuroProxima公司研發了乳鐵蛋白快速 試劑盒,該試劑盒適合檢測嬰配粉中乳鐵蛋白含量
2. 原理 ELISA試劑盒有12條板孔,每條8孔,預包被了抗體。辣根過氧化酶標記的 乳鐵蛋白(-HRP)和標準品或樣品被加入到板孔中。
存在于標準品溶液或樣品 游離的乳鐵蛋白和乳鐵蛋白-HRP酶連接物競爭結合乳鐵蛋白抗體結合位點(競 爭性酶聯免疫)。 孵育30分鐘后,未結合的試劑被洗滌除去。
結合的乳鐵蛋白-HRP酶連接的 量通過加入底物/發色劑(H2O2/四甲基聯苯胺.TMB)顯現出來,連接的酶連接 物將無色的色原物質轉化為有色。加入硫酸終止發色反應,在450 nm下測定吸 光度。樣品中乳鐵蛋白的含量與吸光度值成反比。
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